SYBR Green Master Mix

快速熒光定量PCR試劑盒（SYBR Green） 

別名：SYBR Green熒光定量PCR預混液

產品簡介：

本產品是使用SYBR® Green I嵌合熒光法進行qPCR反應的專用預混液。核心組分為一種新型的抗體法熱啟動DNA聚合酶，具有特異性強、檢測靈敏度高等諸多優點，配以針對qPCR優化的最適Buffer，非常適合于進行高特異性、高靈敏度的qPCR反應。本產品是一種含有qPCR反應最適濃度SYBR® Green I的2×預混液，可以在寬廣的定量區域內得到良好的標準曲線，對靶基因定量準確、重復性好、可信度高。同時，優化的預混液可縮短Real-Time PCR的反應時間，適用于標準或快速PCR儀。 

保存條件：

收到本產品后， 請立即置于-20 ℃ 避光保存,一年有效。從-20 ℃ 取出使用時， 將凍存的qPCR MasterMix和ROX Reference Dye融解，然后輕輕顛倒混勻，待溶液完全均一后再行使用。如解凍后沒有使用，須徹底混勻后重新冷凍。(在解凍過程中鹽會出現分層現象，如未混勻進行冷凍，鹽晶體的析出將會對酶造成損害)。如需一段時間內經常取用，可在2～8℃條件下儲存3個月。避免反復多次凍融。

使用說明：

一、配制 Real-Time PCR反應體系：

1.、將所有試劑qPCR MasterMix，ROX Reference Dye，模板，引物和RNase-Free ddH2O，在室溫下溶解并徹底混勻。

2、建議置于冰上進行Real-Time PCR反應液的配制。

3、蓋上反應管，輕柔混勻。可瞬時離心，確保所有樣品均在管底。

二、進行Real-Time PCR反應

建議采用兩步法PCR反應程序進行反應。

若模板量較低等因素導致擴增效果不佳，可使用三步法程序進行PCR反應。

幾種常見儀器的最適ROX Reference Dye濃度見下表：

常見問題:見說明書

注意事項：

1、本產品中含有熒光染料SYBR Green I，保存本產品或配制PCR反應液時應避免強光照射。

2、如果試劑沒有混勻，其反應性能會有所下降。使用時請上下顛倒輕輕混勻，請不要使用振蕩器進行混勻，盡量避免出現泡沫，并經瞬時離心后使用。

3、引物純度對反應特異性影響很大，建議使用PAGE級別以上純化的引物。

4、引物終濃度為0.3 μM可以在大多數體系中獲得良好的擴增結果。如果需要進一步優化，可以在 0.2-0.5 μM范圍內調整引物濃度。

5、20 μl反應體系中，cDNA模板的使用量一般小于100 ng，基因組DNA模板量一般小于50 ng，逆轉錄產物作為模板時，使用量應不超過PCR體系終體積的20%。

        6、為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。