HaCaT人永生化表皮細胞，細胞凍存：
    1、取待凍存的細胞用胰酶消化，用培養基將細胞沖洗下來。800r/min離心5min，棄上清收集細胞。如果是懸浮培養的細胞，可直接離心收集細胞。
    2、加入適量凍存液（10%甘油+90%培養基，或是10%DMSO+90%培養基）制成細胞懸液。細胞濃度宜大，3*106個/ml左右，并可適量增加小牛血清濃度至20%。
    3、細胞懸液裝入凍存管中。用膠布封裹，做好標記（注明細胞種類、時間、條件等）。
    4、凍存管在4℃下存放30min，轉放-20℃1.5h~2h，再轉入-70℃4~12h后即可轉入液氮內（-196℃），注意進行登記。

     復蘇：
    1、取一搪瓷杯盛上適量自來水加熱至40℃左右。
    2、從液氮中取出凍存管立即投入40℃水中迅速解凍。
    3、取出凍存管，用75%酒精清潔管口，打開。
    4、離心去上清收集細胞，用無血清培養基洗1次，加入3ml新鮮培養基，于小培養瓶中培養。
    5、每日觀察細胞生長情況，如果死細胞較多，復蘇次日應換液。待細胞長滿后進行傳代培養。